接着性培養細胞固定法
Fixation of Adhesive Cultured Cell
接着性培養細胞の試料作製には、樹脂包埋後の離脱に際して割れにくい「厚さ0.45〜0.60 mm」の特注カバーガラスを推奨します。
培養細胞が十分に増殖したことを位相差顕微鏡で確認した後、培養液を固定液（2% パラフォルムアルデヒド／0.5％グルタルアルデヒド／0.1M リン酸緩衝液）に置き換えて室温で20分間固定処理します。
厚みのない培養細胞の固定にはグルタルアルデヒドの濃度を0.5〜1.0％に抑えて、強い固定による過度な収縮を軽減させます。
0.1M リン酸緩衝液で固定液を洗浄した後、1%四酸化オスミウム／0.1M リン酸緩衝液で20分間、氷上において後固定処理します。
オスミウム後固定により細胞は黒色に変化し、肉眼でも確認し易くなります。
